微藻營養豐富，是魚、蝦、貝等經濟動物人工育苗的基礎。微藻的來源則可以從天然水域的混雜生物群中，通過一定方法把所需藻類個體分離開來，從而獲純種培養。而在微藻的培養和應用中，保種技術十分重要，它是微藻培養和進一步應用的基礎和關鍵環節。

1）、玻璃化保存法  玻璃化保存法是近年來發展起來的一種保存方法，與其他超低溫保存方法相比，具有設備簡單、程序簡化和凍存效果好等優點。所謂超低溫保存是區別于其它低溫概念的冰箱溫度(4℃～-40℃)和干冰溫度(-79℃)，是指在液氮低溫(-196℃)下保存，此時生物體的物質代謝和生長活動幾乎完全停止。可是它們仍處于可逆的成活狀態。通過添加一定的抗凍保護劑，防止細胞在降溫冰凍過程中嚴重脫水和低溫休克，避免細胞內冰晶的形成，采用適當的冰凍速度，使細胞安全地越過冰晶形成危險區（從細胞介質或原生質的冰點到-60℃），進入玻璃化狀態，以達到長期保存的目的。

2）、固定化保存法  固定化的藻種被保存在4°C下，黑暗中超過一年，仍然能夠恢復正常的生長，固定化藻類其藻珠十分容易制備且比冷凍保存法來得便宜而且方便使用，可以保存在一般的冰箱中，固定化的藻類還可以很快的恢復自由到一般液體培養基中培養，有研究指出，藻種能夠在膠珠內，在黑暗中低溫下，能夠長期的存活，主要的原因是【海南招聘網】的蛋白核的淀粉鞘提供【海南招聘網】生存基本的需求物質。

3）、平板劃線分離法  由接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，使細胞數量隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來經培養后，便可達到分離純化的目的。

4）、稀釋分離法  取一定量待分離的材料，用培養液稀釋。當稀釋到適宜程度時，可以達到把原混雜生物單個分離培養的目的。

5）、生長曲線  把生長現象在圖上用曲線表示出來的稱為生長曲線。一般群體生長多呈s形曲線（sigmoid curve），這是最普通的生長曲線，可以分為延滯期，指數期，穩定期和衰退期4個階段。在此將一定量的藻種接種于合適的培養基，在適宜的溫度培養時，藻的生長具有規律性。處在不同時間的藻液，用分光光度計測定其吸光度值，以該吸光度值為縱坐標，以生長時間為橫坐標，得到的曲線即為該藻種的生長曲線。

6）、BG-11培養基  培養基是發酵過程或動植物細胞大量培養中供微生物或動、植物細胞的生長、繁殖或積累代謝產物，以合成生物化工產品所必需的營養基質。培養基的選擇應根據生物體生長代謝活動的需要，并有利于合成細胞物質和生物化工產品的生成。培養基中主要含有水、碳源(能源)、氮源、礦物質等。本次實驗以淡水藻為主，所選培養基為BG-11培養基。

BG-11培養基( Blue-Green Medium)

   Component                                Amount               Stock Solution     

 (1) NaNO₃                                  100 mL/L                15.0 g/L dH₂O     

 (2) K₂HPO₄                                 10 mL/L                  2 g/500 mL dH₂O         

 (3) MgSO4·7H₂O                         10 mL/L                 3.75 g/500 mLdH₂O         

 (4 ) CaCl₂·2H₂O                          10 mL/L                 1.8 g/500 mL dH₂O      

 (5 ) Citric acid                             10 mL/L                  0.3 g/500 mL dH₂O 

 (6 )Ferric ammonium citrate          10 mL/L                 0.3g/500ml dH₂O

 (7 ) EDTANa₂                              10 mL/L                  0.05g/500ml dH₂O

 (8) Na₂CO₃                                                 10 mL/L                 1.0g/500ml dH₂O

 (9) A5 （Trace mental solution ）   1ml/L        

                      H₃BO₃                                                 2.86g/L dH₂O

                    MnCl_2·4H₂O                                           1.86g/L dH₂O

                    ZnSO_4·7H₂O                                          0.22g/L dH₂O

                   Na₂MoO_4.2H₂O                                       0.39g/L dH₂O

                  CuSO_4. 5 H₂O                                          0.08g/L dH₂O

                 Co(NO₃)₂.6 H₂O                                        0.05g/L dH₂O

Adjust PH to 7.1 with 1M NaOH or HCl

本文來源:海南招聘網

轉載請注明出處：http://www.tianchengedu.com/